Неоколлагенез после инъекции Ellansé™. Результаты исследования

Автор: Пьер Николау, пластический хирург, преподаватель, член Международного общества эстетической пластической хирургии ISAPS (Франция)

Источник: KOSMETIK international journal, №3/2013, стр. 62-64

На правах рекламы

________________________________________________________________________

Филлеры Ellansе™ (Ellansе-S, Ellansе-M, Ellansе-L и Ellansе-E), разработанные и произведенные компанией AQTIS Medical BV, являются биостимуляторами и, в отличие от других дермальных филлеров, имеют стабильную эффективность, уникальную прогнозируемую продолжительность действия от 1 года (Ellansе™-S) до 4 лет (Ellansе™-E) и полную и предсказуемую биодеградацию (технология STaT™). Ellansе™ состоит из совершенно гладких сферических поликапролактоновых (ПКЛ) микросфер без поперечных связей, однородно взвешенных в особом карбоксиметилцеллюллозном (КМЦ) геле-носителе на водной основе. На рисунке 1 показаны изображения микросфер ПКЛ, полученные при помощи SEM и оптического микроскопа, демонстрирующие гладкую поверхность частиц и идеальную сферическую форму микросфер.

Рис. 1. Изображения микросфер ПКЛ, полученные при помощи SEM и оптического микроскопа

ПКЛ и КМЦ успешно используются в многочисленных, одобренных CE и FDA саморассасывающихся материалах, применяемых в медицине, косметологии и фармации – например, в составе других дермальных филлеров, в пластической и челюстно-лицевой хирургии, в повязках на раны и контролируемом введении лекарств.

Физические характеристики филлера, такие как размер частиц 25–50 мкм, концентрация, гладкая поверхность, идеально сферическая форма частиц, вязкость и эластичность геля-носителя, однородность геля и инъецируемость, идентичны для всего семейства Ellansе™.

Уникальной отличительной особенностью, которая создает прогнозируемую продолжительность действия, является начальная длина полимерной цепочки ПКЛ внутри микросфер. Различная начальная длина этой полимерной цепочки является основой регулируемой и прогнозируемой продолжительности действия Ellanse™.

ПКЛ как саморассасывающийся медицинский полимер является очень перспективным благодаря своей контролируемой и безопасной биодеградации посредством гидролиза связей сложных эфиров, что приводит к образованию нетоксичных продуктов, которые быстро выводятся из организма через естественные метаболические пути. Эти данные были получены в результате многочисленных научных исследований биосовместимости и опубликованы. Полная контролируемая биодеградация ПКЛ была доказана в исследованиях H и C-меченных ПКЛ-имплантатов. Были проведены всесторонние исследования безопасности состава имплантатов Ellansе™, включая исследования в лабораторных условиях, доклинические и клинические исследования. Результаты этой работы показывают, что все филлеры Ellansе™ являются безопасными и биосовместимыми и демонстрируют отличные характеристики.

Ellansе™ является первым дермальным филлером, в котором для волюмизации мягких тканей используются полностью саморассасывающиеся микросферы ПКЛ без поперечных связей.
Все данные филлеры имеют маркировку CE и представлены на рынке более чем в 70 странах.

Дермальные филлеры

Хотя все дермальные филлеры могут придавать объем после введения, их можно разделить на две категории: стимулирующие выработку коллагена (биостимуляторы) и не стимулирующие выработку коллагена (волюмизанты). Такие качества новых волокон коллагена, как тип и плотность вокруг частиц, лежащие в основе филлеров, зависят от нескольких характеристик дермального филлера – в частности, от объема частиц, однородности микросфер в геле, вязкости и эластичности геля, времени всасывания геля-носителя, размера частиц, размера микросфер, формы микросфер, гладкости/шероховатости поверхности и процесса биодеградации.

Коллаген – это основной белок соединительной ткани. Существуют различные типы коллагена, но в коже доминирует коллаген типов I и III. Коллаген типа III чаще всего встречается в быстрорастущих тканях. По мере замедления роста тела содержание коллагена типа III в коже снижается, тогда как содержание коллагена типа I, который является более грубым и стабильным, повышается.

Коллаген в коже формируется фибробластами. Было отмечено, что в процессе реагирования тела на введение инородных тел с дермальным филлером сначала появляется коллаген типа III, который постепенно замещается коллагеном типа I.

Филлер Ellansе™, предназначенный для имплантации в глубокую дерму и гиподерму, состоит из уникальных совершенно гладких микросфер ПКЛ, специально разработанных для оптимальной биосовместимости. Благодаря оптимальной вязкости и эластичности геля-носителя морщины и складки подвергаются мгновенной коррекции сразу после процедуры. Гель-носитель поглощается макрофагами постепенно, в течение нескольких недель после процедуры, на протяжении которых микросферы ПКЛ стимулируют неоколлагенез, чтобы заменить объем поглощенного носителя. Микросферы не поглощаются фагоцитами из-за своего размера и поверхностных характеристик. Микросферы ПКЛ запускают естественную реакцию человеческой кожи и стимулируют естественный процесс заживления ран посредством неоколлагенеза, что приводит к отложению нового коллагена вокруг микросфер.

Метод исследования

Исследование проводилось в Central Animal Facility Утрехтского университета (GDL, Голландия) с одобрения Комитета по этическому отношению к животным (DEC, Утрехтский университет, Голландия). Гистологическое окрашивание и анализ выполнялись в отделении патобиологии факультета ветеринарии. Исследование проводилось в соответствии со стандартом ISO 10993: Оценка биологического действия медицинских изделий; часть 6 (2007): Исследования местного действия после имплантации.
Двум кроликам (белые новозеландские) интрадермально латерально вдоль позвоночного столба была выполнена болюсная инъекция 0,1–0,2 мл Ellansе™-S и Ellansе™-M (рис. 2).

Рис. 2. Фотография кролика после болюсной инъекции ПКЛ дермального филлера

Для гистологического анализа из каждой области инъекции был взят образец ткани, который был сохранен в нейтральном буферном формалине 10%. Слайды были обычным образом окрашены гематоксилином и эозином (HE) и покрыты пикросириусом красным (PSR). PSR-метод является селективной гистохимической реакцией для обнаружения коллагена в обработанной парафином ткани и используется в качестве специфического окрашивания для коллагена типов I и III. Этот краситель известен тем, что улучшает двойное лучепреломление волокон коллагена. PSR связывается с коллагеном и затем демонстрирует яркий рефракционный вид при освещении плоскостью поляризованного света при наблюдении с использованием скрещенных поляризаторов. Неполяризованный PSR является специфическим для коллагена, который окрашен в красный цвет. При поляризации большие волокна коллагена типа I окрашиваются в желтое или оранжевое двойное лучепреломление, тогда как более мелкие волокна коллагена типа III обнаруживают зеленое двойное лучепреломление.

Результаты исследования

Через 9 месяцев после инъекции

Рисунок 3 демонстрирует микрофотографический снимок гистологического образца инъецированной ткани, окрашенного по методике H&E, через 9 месяцев после инъекции.

Рис. 3. Микрофотографический снимок гистологического образца, окрашенного по методике H&E, через 9 месяцев после интрадермального введения Ellansе™-S: с волосяными фолликулами – вверху, зрелым дермальным коллагеном – в середине, кожными мышцами – внизу

Рис. 4. Микрофотографический снимок PSR-окрашенной ткани под неполяризованным светом через 9 месяцев после введения Ellansе™-M. Заметно однородное распределение ПКЛ микросфер и их фиксация в структуре коллагена (*)

Микрофотографический снимок демонстрирует зрелый коллаген без каких-либо следов КМЦ геля-носителя или ПКЛ микросфер, что указывает на то, что гель-носитель и ПКЛ микросферы саморассосались и были выведены организмом из места инъекции. Микрофотографический снимок ткани под неполяризованным светом через 9 месяцев после введения Ellanse™-M показан на рисунке 4.

Окрашивание в красный цвет подтверждает образование нового коллагена вокруг микросфер ПКЛ, что приводит к фиксации структуры коллагена микросферами ПКЛ. Микросферы ПКЛ все еще однородно распределены, а вокруг имплантата не было обнаружено ни миграции, ни инкапсуляции.

Рисунок 5 демонстрирует более подробное изображение той же самой инъецированной ткани. Через 9 месяцев после инъекции микросферы Ellansе™-M по-прежнему имеют сферическую форму и не затронуты на этом этапе процесса саморассасывания. Микрофотографический снимок неполяризованного PSR-окрашенного гистологического образца подтверждает отложения коллагена (рис. 5a). Поляризованное (рис. 5b) PSR-окрашивание обнаружило присутствие как красно-оранжевого, так и зеленого двойного лучепреломления, что указывает на отложение волокон коллагена типов I и III, следовательно, подтверждает неоколлагенез, вызванный абсолютно гладкими и сферическими микрочастицами ПКЛ. Через 9 месяцев после инъекции микросферы ПКЛ закреплены в новом коллагене с высококачественной структурой.

Рис. 5a. Микрофотографический снимок PSR-окрашенной ткани под неполяризованным светом через 9 месяцев после введения Ellansе™-M. Рисунок демонстрирует новую сформированную структуру коллагена

Рис. 5b. Микрофотографический снимок PSR-окрашенной ткани под поляризованным светом через 9 месяцев после введения Ellansе™-M. Рисунок демонстрирует типичное оранжево-красное и зеленое двойное лучепреломление с красным (отмечено стрелками) коллагеном типа I и зеленым (отмечено наконечниками) коллагеном типа III

Через 21 месяц после инъекции

На рисунке 6 представлен микрофотографический снимок ткани через 21 месяц после введения продукта Ellanse™-M (под (a) неполяризованным светом и (b) поляризованным светом). Микросферы Ellansе™-M все еще присутствуют, встроенные в структуру коллагена. Поляризованное PSR-окрашивание (рис. 6b) демонстрирует присутствие красно-оранжевого двойного лучепреломления, обнаруживая наличие волокон коллагена типа I.

Рис. 6a. Микрофотографический снимок PSR-окрашенного гистологического образца под неполяризованным светом через 21 месяц после введения Ellansе™-M. Красное окрашивание подтверждает образование нового коллагена

Рис. 6b. Микрофотографический снимок PSR-окрашенного гистологического образца под поляризованным светом через 21 месяц после введения Ellansе™-M. Красное окрашивание указывает на наличие волокон коллагена типа I

Выводы

Представленные данные демонстрируют биосовместимость и саморассасывание ПКЛ дермального филлера. Гистологический анализ подтвердил, что микросферы ПКЛ обеих версий продукта вызывают формирование нового коллагена. Благодаря гладкости и сферической форме микрочастиц ПКЛ формируется высококачественная структура нового коллагена.

Через девять месяцев микросферы ПКЛ продукта Ellansе™-S полностью саморассосались. Это согласуется с данными клинического исследования после обработки носогубной складки, когда клиническая эффективность снизилась через 12 месяцев.

Микросферы ПКЛ продукта Ellansе™-M все еще присутствовали через 9 месяцев после введения, по-прежнему имели сферическую форму и были однородно распределены в ткани, без признаков миграции или инкапсуляции. Микросферы ПКЛ продукта Ellansе™-M все еще присутствовали через 21 месяц после инъекции, встроенные в структуру коллагена, состоящую преимущественно из волокон коллагена типа I. Таким образом, полученные данные демонстрируют уверенное и долговременное присутствие коллагена и замещение коллагена типа III более крупными волокнами коллагена типа I, что согласуется с нормальным физиологическим процессом заживления ран.