Омоложение кожи коллагеном І типа Linerase

---

Андреа Корбо, доктор медицины, профессор университета Камерино (MC) (Италия)

Сесилия Лучи, медицинский директор частной клиники MedicalSpa (Италия)

Джованни Мероне, медицинский директор частной клиники MedicalSpa (Италия)

---

Биоомолаживающие методы лечения основаны на повторении нескольких сеансов в соответствии с различными протоколами, которые направлены на обеспечение анаболической стимуляции кожных фибробластов. В итоге усиливается биосинтез компонентов дермального матрикса и гидратация, наблюдается эффект подтягивания кожи и восстановление фибриллярной сети. Результаты биоомоложения обычно удовлетворительны на начальной и средней стадиях фото- и хроностарения кожи, однако нужно периодически проводить поддерживающий курс.

В нижеследующем исследовании авторы протестировали новый медицинский препарат для биоомоложения III класса на основе гетерологичного коллагена I типа, оказывающий благотворное воздействие на кожу на всех этапах ее старения. Для этого авторы данной статьи определили оптимальную дозировку препарата, рассказали о необходимости соблюдения пациентом режима и схемы лечения, об определении степени удовлетворенности клиента, а также предложили наилучший протокол для сохранения и закрепления результатов лечения.

Интерес к омолаживающим косметологическим процедурам значительно возрос в последние годы. В основе таких процедур могут лежать как физические методы воздействия, а именно радиочастоты, лазер и интенсивный импульсный свет, так и биохимические методы, предусматривающие применение инъекционных препаратов на основе некрослинкованной гиалуроновой кислоты, полинуклеотидов, витаминов, органического силикона и многих других.

Характеристика препарата и обоснование его применения

Вот уже 30 лет в дерматологии, наряду с пластической и сосудистой хирургией, для заживления ран и лечения язв используется гетерологичный коллаген I типа. Самый популярный препарат такого рода изготовлен на основе патчей лиофилизированного коллагена. Обычно они накладываются прямо на рану и, стимулируя регенерацию тканей, ускоряют заживление. Доказано, что гетерологичный коллаген влияет на митоз фибробластов, регенерацию тканей и стимуляцию биосинтеза нового коллагена.

Гетерологичный коллаген получают из ахиллова сухожилия лошади. Во время производственного процесса структура молекулы коллагена не претерпевает химических изменений вроде денатурации белка или сшивания. Единственная химическая манипуляция предполагает отделение последовательностей коллагеновой тройной спирали от N- и C концевых аминокислотных, и таким образом отсутствует риск развития аллергии.

В ходе данного исследования гетерологичный коллаген микронизировали, полученный порошок поместили во флаконы и стерилизовали. Непосредственно перед использованием измельченный порошок восстанавливали в водном растворе хлорида натрия 0,9% или в воде для инъекций с добавлением небольшого количества анестетика. В итоге получалась суспензия, предназначенная для введения внутрикожно.

Предполагаемый механизм действия основан главным образом на присутствии трипептидов, в частности Pro-Hyp-Gly, полученного при гидролизе коллагена. Фактически гидролиз пептидных связей может происходить как in vivo после инъекции препарата в принимающие ткани, так и in vitro – в том же флаконе после восстановления продукта. Попадая в физраствор, гетерологичный коллаген подвергается спонтанному гидролизу, образует трипептиды и коллагеновые аминокислоты. Это гарантирует полное отсутствие какого-либо риска иммуногенности, поскольку масса молекул, способных вызывать иммунный ответ организма, должна превышать 10 кДа, тогда как в препарате гетерологичного коллагена масса молекул не превышает 3–6 кДа (трипептиды).

Трипептиды – биологические мессенджеры, действующие аналогично факторам роста. Взаимодействуя с трансмембранными рецепторами, они активируют анаболические пути и стимулируют клеточный цикл фибробластов. Трипептид Pro-Hyp-Gly работает как конкурентный ингибитор матриксных металлопротеиназ (MMP), отвечающий за ферментативную деградацию коллагена (коллагеназа).

Наконец, свободные аминокислоты, присутствующие в препарате, по кинетике Михаэлиса – Ментен, стимулируют работу фибробластов и синтез нового коллагена. Некоторые исследования in vitro показали, что молодые фибробласты, то есть фибробласты, образованные в результате клеточного деления, синтезируют преимущественно коллаген III типа, тогда как более старые фибробласты – в основном коллаген I типа. Известно, что соотношение коллагена I/III увеличивается по мере старения кожи.

Для заживления ран и лечения язв в дерматологии используется лошадиный коллаген I типа. Доказано, что он влияет на митоз фибробластов, регенерацию тканей и стимуляцию биосинтеза нового коллагена.

Исследования и результаты

Для определения оптимальной дозы были использованы три разные дозировки гетерологичного коллагена. 120 пациентов в возрасте от 35 до 65 лет разделили на три группы по 40 человек в каждой. Каждой группе назначали разные дозы: 50, 100 и 200 мг мелкодисперсного стерильного порошка, восстановленного в 4,5 мл физиологического раствора с добавлением 0,5 мл 2% раствора лидокаина.

Полученный препарат вводили испытуемым внутрикожно методом точечной мезотерапии – около 0,1 мл на инъекцию. Кожные папулы были сосредоточены на расстоянии 2 см на лице, шее, в области декольте и на руках. Каждый пациент получил четыре сеанса лечения – по одному каждые 2 недели в течение 8 недель. Состояние кожи до и после лечения задокументировано на фото. Все ощущения пациентов зафиксированы.

Из субъективных ощущений испытуемые отмечали главным образом покраснение, повышение температуры кожи в месте введения и дискомфорт, болезненность в месте введения. В группе, которой назначили дозу 50 мг, один из испытуемых жаловался на вышеперечисленные ощущения продолжительностью от нескольких часов до суток; в группе с дозировкой коллагена 100 мг один пациент отмечал дискомфорт в месте введения длительностью от нескольких часов до суток; в группе, получающей 200 мг препарата, восемь пациентов сообщили об ощущениях продолжительностью от нескольких часов до суток.

Динамику улучшения состояния кожи оценивали сами испытуемые и доктор. Пациентов просили заполнить анкету, чтобы выяснить их мнение о текстуре собственной кожи, ее яркости, увлажненности и упругости. Результаты групп, которым была предписана дозировки 100 и 200 мг, оказались сходными, тогда как в группе с дозировкой 50 мг динамика была хуже.

Эффективность лечения оценивалась посредством наблюдения за изменением состояния кожи пациента после четырех сеансов лечения. 20 пациентов в группе с дозировкой 50 мг отметили улучшение внешнего вида кожи после четырех сеансов лечения, в то время как в группе с дозировкой 100 мг улучшение внешнего вида кожи подтвердили 38 пациентов, а в группе с дозировкой 200 мг – 39 (рис. 1).

В итоге для дальнейшего лечения в качестве оптимальной была определена доза 100 мг, поскольку соотношение между эффективностью лечения и риском возникновения дискомфортных ощущений в этом случае лучше.

Для комплексного лечения кожи лица, шеи, области декольте и рук 321 пациенту вводили по 100 мг гетерологичного коллагена (0,1 мл каждые 2 см, 1 сеанс каждые 2 недели, всего – 4 сеанса) в соответствии с протоколом, описанным выше (100 мг порошка, растворенного в 4,5 мл физиологического раствора с добавлением 0,5 мл лидокаина 2%, общий объем раствора – 5 мл). Как и в случае предыдущей группы, был подготовлен фотоотчет, проведено анкетирование.

Среди основных ощущений длительностью от нескольких часов до суток, отмеченных менее чем 1% пациентов, – покраснение кожи, зуд, возникновение на обработанных участках кожи незначительных болезненных ощущений или дискомфорта (рис. 2). При сборе данных не учитывался временный дискомфорт в конце сеанса лечения, поскольку он возникает вследствие любых инъекций, независимо от используемого материала.

В результате лечения текстура, структура, яркость и гидратация кожи пациентов улучшились более чем в 95% случаев. Практически все испытуемые отметили восстановление текстуры кожи, 3 человека не заметили изменений ее структуры, 46 пациентов отметили, что яркость кожи не изменилась, а еще 27 не наблюдали после лечения эффекта увлажнения (рис. 3).

Тест split face проводили у 64 пациентов, которых разделили на две группы по 32 человека. Препарат использовали в дозе 100 мг. В первой группе пациентов инъецировали половину лица свежеприготовленным препаратом, а вторую половину – раствором 2-дневной давности, который хранили при температуре 4 °С. Во второй группе пол-лица инъецировали свежеприготовленным раствором, вторую половину – раствором, приготовленным 4 дня назад. Инъекции проводились в соответствии с протоколом, описанным выше. Во всех случаях дозировка определялась согласно стандартному протоколу, раствор готовили с использованием указанного объема физиологического раствора и анестетика и вводили точечно в одинаковых объемах (по 0,1 мл через 2 см).

В ходе проведения теста авторы обнаружили значительное снижение эффективности при использовании четырехдневного раствора: ответ был слабым. Участки кожи, в которые авторы вводили раствор, приготовленный 4 днями ранее, продемонстрировали слабый ответ, в то время как 2-дневный препарат показал хорошие результаты. По оценке пациентов, только те участки кожи, в которые инъецировали свежеприготовленную суспензию, продемонстрировали наилучшие результаты (фото 1 А-В). Полученные данные подтверждены клинической оценкой.

Фото 1 А-В. Восстановление текстуры и упругости кожи – наиболее выраженный результат лечения гетерологичным коллагеном. Этот результат был достигнут при лечение пациентов разных возрастных групп и с различной степенью выраженности хроно- и фотостарения кожи.

На последнем этапе исследования авторы испытали протокол для сохранения и закрепления результатов лечения. 80 пациентов разделили на две подгруппы (A и B) по 40 человек. Для каждой группы дозировка препарата была разной. В группе А для лечения применяли 70 мг коллагена за сеанс, пациентам было назначено три сеанса каждые 2 недели, чтобы общая доза составила 210 мг, в то время как в группе B пациентам назначили такую же дозу за четыре сеанса.

В результате лечения текстура, структура, яркость и гидратация кожи пациентов улучшились более чем в 95% случаев. Практически все испытуемые отметили восстановление текстуры кожи

На последнем этапе исследования авторы испытали протокол для сохранения и закрепления результатов лечения. 80 пациентов разделили на две подгруппы (A и B) по 40 человек. Для каждой группы дозировка препарата была разной. В группе А для лечения применяли 70 мг коллагена за сеанс, пациентам было назначено три сеанса каждые 2 недели, чтобы общая доза составила 210 мг, в то время как в группе B пациентам за четыре сеанса с промежутком 2 недели вводили по 100 мг коллагена, в общей сложности – 400 мг. Контроль результатов осуществлялся в течение 6 месяцев и включал клиническое обследование и анкетирование.

По результатам исследования авторы наблюдали более удовлетворительный результат спустя 6 месяцев после четырех сеансов лечения коллагеном в дозировке 100 мг 1 раз в 2 недели.

В ходе ежемесячных обследований пациентов выяснилось, что результаты лечения, приведенные ими в ходе анкетирования, быстрее шли на спад в группе, в которой испытуемым назначили три сеанса введения препарата в дозе 70 мг за сеанс (фото 2 А-В).

Фото 2 А-В. Внешний вид кожи значительно улучшился после первой из двух процедур лечения гетерологичным коллагеном I типа.

История применения гетерологичного коллагена позволяет говорить об отсутствии аллергической реакции на него и о высокой безопасности препарата.

Резюме

В области косметической медицины наблюдается растущий спрос на процедуры, улучшающие внешний вид кожи и обладающие в первую очередь омолаживающим лечебным эффектом, а не только направленные на коррекцию или увеличение объема.

Поэтому сегодня рынок готов предложить широкий ассортимент инъекционных продуктов с омолаживающим действием. В частности, широкое применение получила некрослинкированная гиалуроновая кислота. Омолаживающие инъекции гиалуроновой кислоты влияют преимущественно на гидратацию клеток кожи, соотносимую с эффектом чистки активных форм кислорода, однако место для сомнений остается.

C другой стороны, она, по сути, активирует экспрессию гена металлопротеиназы, что приводит к повышению деградации внеклеточного матрикса. По этой же причине рекомендуется совмещать лечение коллагеном с применением других биостимуляторов, которые помогут повысить производство коллагена и снизить активность металлопротеиназ. Основным сдерживающим фактором для классических биоомолаживающих биостимулирующих инъекционных процедур (полинуклеотиды, витамины) является остаточное анаболическое действие старых фибробластов. Поэтому необходимо изучить возможность применения гетерологичного коллагена. Доказано, что он стимулирует митоз фибробластов и регенерацию тканей. Молодые фибробласты, образовавшиеся в результате митоза, обладают большим анаболическим действием и способностью выработки большего количества коллагена III типа, чем старые клетки. Наконец, более чем 30-летняя история применения гетерологичного коллагена позволяет говорить об отсутствии аллергической реакции на него и о высокой безопасности препарата, что очень важно, когда речь идет о косметологических инъекциях.