Клітинні технології у косметології

Яна Гончарова, доктор медичних наук, професор кафедри дерматовенерології та косметології Донецького національного медичного університету ім. М. Горького, директор клініки естетичної медицини «Леге Артіс» (Україна)
Оксана Селезньова, лікар-консультант Міжнародного центру біотехнологій "Біостем" ІНВХ ім. В. К. Гусака АМН України, куратор програми зі збереження стовбурових клітин пуповинної крові (Україна)

Широкі можливості
Безумовно, застосування клітинних технологій не обмежується косметологією, - скоріше навіть, це невелика, але частина всіх можливостей цього методу, що динамічно розвивається.

Ефекти, очікувані від введення клітинного матеріалу, можуть бути замісними (введення клітинної маси кератиноцитів і фібробластів в опікову рану або діабетичну виразку з метою її епітелізації), відновними (введення аутологічних стромальних стовбурових клітин, попередньо диференційованих, у клітини хворого підшлункової залози і т. д.), що стимулюють (введення фетальних стовбурових клітин, плазми, збагаченої тромбоцитами, фібробластів).

Стовбурові клітини знайшли широке застосування під час лікування опорно-рухового апарату, опікової хвороби, ендокринної патології, захворювань крові, печінки, серця, нервової системи. І це далеко не повний перелік, коли, використовуючи клітинні технології, ми досягли покращення якості життя пацієнта, підвищення життєвого тонусу та працездатності. І якщо говорити про якість життя, то тут і постає питання про косметологію, оскільки людина хоче не тільки продовжити своє життя, але й залишатися при цьому здоровою, активною, з мінімальними зовнішніми ознаками старіння на шкірі.

Зараз ми знаходимося на черговому еволюційному щаблі косметології, коли вже точно відомо, як максимально використовувати ін'єкції ботулотоксину та філерів, і вже впритул підібралися до сутності вирішення проблеми старіння – омолодження клітин.

У зв'язку з цим фібробласти є однією з найцікавіших точок застосування клітинних технологій, оскільки забезпечують морфофункціональну організацію шкіри в нормі та при патології, беручи активну участь у відновленні її цілісності після пошкодження, реалізуючи як фізіологічний, так і репаративний гістогенез у дермі. Також вони займають значне місце в системі нейроендокринної регуляції шкіри, оскільки здатні синтезувати біологічно активні пептиди, гормони, нейропептиди, біогенні аміни і т. д. Фібробласти дерми мають рецептори андрогенів та естрогенів, через які вони реагують на гормональні впливи, опосередковуючи дію шкіру людини. Велику роль фібробласти грають реакції імунної відповіді, організуючи відповіді сполучної тканини на інфекцію або пошкодження. Виходячи з перерахованого вище, саме фібробласти дерми повинні бути основною точкою застосування терапевтичних втручань при патології шкіри.

Найбільш безпечним є введення власних клітин або препаратів із власних клітин, наприклад, власних фібробластів або плазми, збагаченої тромбоцитами. Логічним є питання, про яке омолодження може йтися, якщо ми в результаті вводимо свої ж «старі» клітини? Відповідь: клітини хоч і старі, але вирощені на збагаченому живильному середовищі

Фібробласти активно використовують для корекції дефектів шкіри. Дермальний еквівалент може бути представлений як результат поєднання носія та культури власних або алогенних фібробластів. Фібробласти спільно з кератиноцитами використовуються для створення комбінованого «аналогу шкіри» та успішно застосовуються в камбустіології. Ведуться величезні дослідницькі роботи з застосування фібробластів у таких галузях медицини, як урологія, нейрохірургія, серцево-судинна, стоматологія та ін., коли культурою фібробластів заселяють носії з різних органічних матеріалів для отримання графтів для трансплантації різних органів.

Накопичений досвід

А тепер повернемось до косметології. У процесі старіння організму спостерігається зменшення загальної чисельності популяції фібробластів (з кожним роком кількість активних фібробластів у дермі скорочується приблизно на 1%), а також зниження продукції колагену 1-го та 3-го типів, міжклітинної речовини та гіалуронової кислоти, що закономірно є зміною якісного та кількісного складу дерми.

В результаті стає тонше дермальний шар, знижується рівень вологи, що міститься в ньому, шкіра розтягується і стає в'ялою. Так утворюються зморшки. Особливо швидко і помітно це відбувається на відкритих ділянках тіла та у місцях згинів. Для того, щоб нівелювати вікові зміни, ще у 70-х роках минулого століття естетична медицина стала активно практикувати ін'єкції штучного колагену. Результати були досить непогані, але вони зберігалися недовго: три – шість місяців. До того ж, при неправильному введенні препаратів виникали ускладнення, точніше, дефекти: у місці ін'єкцій утворювалися ущільнення та нерівності. У результаті було вирішено шукати шляхи та способи використання натурального колагену. На той момент вже були дані більш ніж півстолітнього вивчення клітинних технологій, але досвід вирощування окремих клітин був недостатнім.

У 1997 році компанія Isoladgen створила препарат з аналогічною назвою та запатентувала метод відновлення дефектів шкіри та м'яких тканин за допомогою ін'єкцій фібробластів. Провівши успішні клінічні випробування, методику почали активно застосовувати: спочатку в хірургії – для лікування опіків, які тривалий час не гояться великих ран та інших пошкоджень шкіри, що вимагають регенерації тканин; трохи пізніше в косметології - для позбавлення від акне; в anti-age-терапії – для корекції зморшок та омолодження, а також у трихології – для лікування алопеції. Однак у зв'язку з відкриттям наприкінці ХХ століття таких хронічних та небезпечних інфекцій, як вірусні гепатити В та С, ВІЛ/СНІД, пріонні інфекції, застосування клітинних технологій значно обмежилося.

Найбільш безпечним є введення власних клітин або препаратів із власних клітин, наприклад, власних фібробластів або плазми, збагаченої тромбоцитами. Логічним є питання, про яке омолодження може йтися, якщо ми в результаті вводимо свої ж «старі» клітини? Відповідь: клітини хоч і старі, але вирощені на збагаченому живильному середовищі. До того ж процес введення біологічного матеріалу вже є гарною стимуляцією для організму. Програма омолодження з використанням власних фібробластів, розроблена спільно з лабораторією «Біостем» та клінікою «Леге Артіс», що включає як доклінічні, так і клінічні дослідження, продемонструвала свою безпеку та ефективність.

Застосування у косметології

Показанням до введення власних фібробластів є зниження пружності та еластичності шкіри – дві функції дерми, які опосередковано через функцію колагену та глікозаміногліканів пов'язані з активністю фібробластів дерми. Оскільки падіння активності фібробластів та зменшення їх кількості пов'язане в більшості випадків з віковими змінами, вони є основним показанням.

Результати, які очікуються від процедури введення власних фібробластів, – це покращення пружності та еластичності шкіри. Варто також відзначити покращення кольору обличчя, розгладження дрібних зморшок, покращення зовнішнього вигляду рубців.

Протипоказання: вагітність та лактація, системні захворювання, неопластичні процеси. Для виключення перелічених вище станів, крім збору даних анамнезу, проводяться необхідні лабораторні дослідження.

І етап програми: забір матеріалу. Виконується в завушній ділянці за допомогою punch-біопсії під місцевою анестезією кремом з лідокаїном. Свіжий біологічний матеріал негайно доставляється в лабораторію клітинного та тканинного культивування, де після попередньої підготовки починається процес вирощування клітин.

ІІ етап програми: вирощування клітин. Культивування клітин виконується з використанням живильного середовища ДМЕМ та F12 у співвідношенні 1:1 з додаванням 20% ЕТС (ембріональної телячої сироватки) та FGF (фактору росту фібробластів). Культуральні флакони поміщаються в СО2-інкубатор з режимом 37 ° С та 5% СО2. З метою масштабування культура дермальних фібробластів піддається пасеруванню з використанням розчинів Версена та трипсину. Після отримання необхідної кількості клітин (20 млн) частина з них вводиться пацієнту, решта клітин заморожується в кріосередовищі і поміщається в рідкий азот для довготривалого зберігання.

ІІІ етап програми: введення біологічного матеріалу. Суспензія, що містить фібробласти, вводиться методом мезотерапії внутрішньодермально, переважно у проблемні зони обличчя (зморшки, рубці). Важливо, скільки клітин ми вводимо. Виходячи з нашого досвіду, найбільш оптимальним є від 3 до 5 млн фібробластів, кількість визначається мікроскопічно у самій лабораторії. Періодичність процедур – 1 раз на 3 тижні. Кількість процедур курсу – 4–5.
Після закінчення курсу лікування частину клітин можна зберігати у кріобанку. Таким чином, їх у будь-який час можна активувати та повторити курс лікування. Повторні процедури рекомендуються не частіше ніж один раз на рік.

З прицілом на майбутнє

Результати, які очікуються від процедури введення власних фібробластів, – це покращення пружності та еластичності шкіри. Варто також відзначити покращення кольору обличчя, розгладжування дрібних зморшок, покращення зовнішнього вигляду рубців. При цьому слід розраховувати не тільки на швидкий ефект, який можна пояснити дратівливою дією біологічного матеріалу, а й на довготривалий, зумовлений початком функціонування частини фібробластів, які «прижилися» в дермі. Звичайно, можна погодитися з тим, що подібних ефектів можна очікувати і від багатьох інших методів, які застосовуються у косметологи. Однак жоден із них не забезпечує безпосереднього збільшення кількості власних фібробластів за рахунок своїх власних, запроваджених ззовні. Незважаючи на те, що частина цих фібробластів зазнає руйнування, як було показано в дослідженнях in vitro, «уламки» таких фібробластів є потужним стимулюючим біологічним матеріалом.
Безперечно, говорити про те, що введення клітин здатне повернути час назад і вирішити проблеми старіння, було б некоректно. Більше того, проводячи клітинну терапію, ми не відмовляємося від традиційних методів корекції (введення наповнювачів, ін'єкції ботулотоксину, апаратна косметологія тощо). Однак саме введення власних фібробластів дозволяє омолодити клітинний склад та забезпечити реальне покращення стану основних елементів дерми. Саме тому фібробласти мають величезну точку застосування у регенераційній медицині. Це новий крок у розвитку естетичної медицини, що дозволяє оцінити естетичну дерматологію як один із напрямів медицини якості життя.

Вперше опубліковано: KOSMETIK international journal, №2/2012